簡要描述:油紅O為脂溶性染料,在脂肪內能高度溶解,可特異性的使組織內甘油三酯等中性脂肪著色,油紅O脂肪染色法指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內的脂肪常采用油紅O進行染色的方法。
詳細介紹
油紅O染色是鑒定間充質干細胞向成脂細胞分化的一個重要指標。用特定的成脂誘導培養(yǎng)基(貨號:CTCC-JD003)培養(yǎng)一段時間后 ,間充質干細胞可分化為成脂細胞,并在細胞中形成脂滴。油紅O屬于偶氮染料,是很強的脂溶劑和染脂劑,與甘油三酯結合呈小脂滴狀。脂溶性染料能溶于細胞中的脂滴。當染料加入細胞中,染料則離開染液而溶于細胞內的脂滴中,使細胞內的脂滴星紅色或橘紅色。
油紅O工作液制備:
油紅染色液與染色稀釋液按照3:2的比例進行稀釋,混勻后室溫靜置10min,濾紙過濾;
移除孔內培養(yǎng)基,每孔加入2ml洗滌液1號靜置1min后移除,洗滌2次;
每孔加入2ml固定液,37°C (或室溫)固定30min ;
移除固定液。每孔加2ml洗滌液1號沖洗,洗滌2次;
每孔加入油紅O工作液2ml,37°C (或室溫)染色10-20min ;
每孔加入洗澡液3號2ml,快速移除,根據染色背景情況可重復1-2次;
每孔加洗滌液2號2ml,洗2次后顯微鏡下觀察。
實驗結果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,細胞核呈深藍色。
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