細胞MTT實驗

簡要描述：細胞MTT實驗：MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲臜（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。

更新時間：2022-12-23
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MTT法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,可作用于活細胞線粒體中的呼吸鏈,在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用下,外源性MT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚( Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm(參比波長630m)波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi),MT結(jié)晶形成的量與活細胞數(shù)成正比。

注意事項：
MTT法只能用來檢測細胞相對數(shù)和相對活力。在用酶標儀檢測結(jié)果的時候，為了保證實驗結(jié)果的線性，MTT 吸光度在0-0.7 范圍內(nèi)。
MTT一般現(xiàn)用現(xiàn)配，過濾后4℃避光保存兩周內(nèi)有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存，避免反復(fù)凍融，小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。
MTT有致癌性，用的時候注意防護，配成的MTT需要無菌。
配制MTT時用PBS溶解,也有人用生理鹽水配，60℃水浴助溶。

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